Orlandon yökerhoammuskelu 2016 tapahtui Floridan Orlandossa 12. kesäkuuta 2016, kun aseistautunut mies hyökkäsi seksuaali- ja sukupuolivähemmistöille suunnatuun orlandolaiseen Pulse-yökerhoon. Tekijän ampumiin luoteihin kuoli ainakin 49 ihmistä, ja 53 haavoittui.
Ampuminen on herättänyt keskustelua siitä, onko viha seksuaalivähemmistöjä kohtaan kasvanut entisestään.